犬CRP- 系统性炎症标志物

犬CRP已经广泛应用于炎症诊断及炎症严重性评估。若干研究证实cCRP也是一种检测急相应答非常有价值的标志物。在病毒或细菌感染、败血症及子宫蓄脓等多种炎症性紊乱中均有发现cCRP浓度水平的迅速升高,同时在外科手术中也可以检测到cCRP的升高(1-3)


犬C反应蛋白(cCRP)是一种犬的主要急相蛋白。



犬C反应蛋白(cCRP)是一种犬的主要急相蛋白。在系统性炎症发作期间,cCRP的浓度水平会迅速显著升高。随着炎症源的清除,cCRP的浓度水平又会迅速下降至正常水平。

犬CRP已经广泛应用于炎症诊断及炎症严重性评估。若干研究证实cCRP也是一种检测急相应答非常有价值的标志物。在病毒或细菌感染、败血症及子宫蓄脓等多种炎症性紊乱中均有发现cCRP浓度水平的迅速升高,同时在外科手术中也可以检测到cCRP的升高(1-3)。



CRP属于pentraxins家族。这些保守的蛋白质是五聚体,具有钙依赖配体结合特性。CRP由五个相同的亚基组成环状结构。 

参考文献:
1. Kjellgaard-Hansen, M. Canine C-reactive protein – a study on the applicability of canine serum C-reactive protein. Ph.D. Thesis. 2004, The Royal Veterinary and Agricultural University, Denmark.

2. Cerón J.J., Eckersall P.D. and Martýnez-Subiela S. Acute phase proteins in dogs and cats: current knowledge and future perspectives. Vet. Clin. Pathol. 2005 Jun; 34(2):85-99.

3. Eckersall P.D. and Bell R. Acute phase proteins: Biomarkers of infection and inflammation in veterinary medicine. Vet. J. 2010, 185:23-27.


技术报告

Canine CRP (cCRP) 技术报告


推荐的抗体配对

右表中给出了最敏感的捕获检测对。 这些建议基于使用我们内部的DELFIA®免疫测定平台获得的结果。 请注意,根据测定平台和反应条件,抗体的性能可能有所不同。 因此,最好始终对每种测定法分别验证最佳抗体组合。

用于cCRP检测的夹心免疫分析

我们的四个单克隆抗体中的三个可以用于夹心免疫分析。 推荐的MAb组合在三明治荧光免疫测定法中显示出高灵敏度(最高0.1 ng / ml)和长线性范围。 图1.显示了使用单克隆抗体cCRP11和cCRP1分别捕获和检测的天然cCRP的校准曲线。

图1.三明治荧光免疫测定法中天然cCRP的校准曲线。 在该测定中,将cCRP11用作捕获抗体,将Eu3 +标记的cCRP1用作检测抗体。

血清样品中cCRP的检测

我们通过测量具有不同来源的全身性炎症的犬的血清样品中的cCRP浓度和健康犬的血清样品中的cCRP浓度,测试了单克隆抗体检测血清样品中内源性cCRP的能力。 大多数MAb组合能够以可靠的方式检测内源性cCRP。 图2显示了分别使用cCRP34和cCRP1作为捕获抗体和检测抗体来测量cCRP浓度的示例。 测量了34只发炎的狗和8只健康的狗的血清样品。 结果表明,与健康犬相比,具有炎症的动物组中cCRP的浓度要高得多。


图2.健康犬或系统性炎症犬血清中的cCRP水平。 cCRP34和Eu3 +标记的cCRP 1分别用作捕获和检测MAb。

重组cCRP部分糖基化

我们的重组cCRP是在真核表达系统中产生的,该系统允许蛋白质进行糖基化。 当纯化的蛋白质在还原条件下在SDS-PAGE中运行时,它以两条独立的条带迁移,类似于天然cCRP(请参见图3)。 较快的迁移带(b)代表未糖基化的亚基。 迁移较慢的条带(a)代表糖基化的亚基。 它们迁移的差异表明糖基化模式不同。 但是,这不会影响重组cCRP的免疫化学特性。


图3. SDS-PAGE中重组和天然cCRP的比较。 在还原条件下,在12.5%的凝胶中电泳3 µgof纯化的蛋白质。 凝胶用考马斯亮蓝R-250染色。a:糖基化CRPb:非糖基化CRP


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